磺化Cy3.5-马来酰亚胺 [ Sulfo-cyanine3.5 maleimide ]

磺化Cy3.5(sulfo Cyanine 3.5; sulfo Cy3.5)是一种发红色荧光的花青素类荧光染料。磺化Cy3.5是磺化修饰过的Cy3.5，水溶性好，它在显影时可以用561nm或者594nm的激光束激发然后用 Texas Red® 或相似的滤片观察，所以也是一种非常常用的标记染料。磺化Cy3.5可以用来标记蛋白，抗体，多肽,核酸分子，纳米粒等。由于强水溶性加带电荷，磺化花青素标记的生物分子更稳定，不易产生疏水性聚集。

马来酰亚胺(maleimide)是生物标记反应中常用的基团，它可以和巯基(-SH)通过亲和加成反应生成稳定的巯醚(thioester)结构从而实现标记。尽管胺基(比如赖氨酸精氨酸侧链)也有亲和性，但在中性或微酸性缓冲液中，马来酰亚胺选择性标记巯基(反应速度比胺基快>1000倍)。标记反应反应迅速，选择性高，产率好，另外，巯基是一种在生物分子中广泛存在的官能团，比如蛋白中的半胱氨酸(cysteine)和双硫键等，因此马来酰亚胺/巯基(maleimide/thiol)标记已成为仅次于NHS/胺基标记的最常用生物连接反应(bioconjugation)。

磺化Cy3.5-马来酰亚胺的水溶性非常好，所以可以在水相的标记反应体系中直接使用，不需要有机溶剂助溶，特别适合标记对有机溶剂敏感的生物分子。另外磺化Cy3.5水溶性极好，并且染料分子本身带电荷，标记到蛋白表面后不会引发疏水性聚集，提高荧光标记产物的稳定性。磺化Cy3.5-马来酰亚胺也溶于甲醇，DMSO，DMF等有机溶剂，标记反应也可以在纯有机溶剂中进行。如需脂溶性Cy3.5染料，可选择普通花青素（cyanine），即Cy3.5-马来酰亚胺 D10035 )。

Cy3.5-马来酰亚胺标记后的产物Ex/Em是591nm/604nm。和它具有相似荧光特性的染料包括Texas Red®，Alexa Fluor 594, BODIPY® TR, DyLight 594等。

注意事项

• 天然生物分子中巯基一般于氧化状态(如双硫键)存在，在马来酰亚胺标记前，务必用还原剂(如DTT，TCEP)活化巯基并除去多余还原剂。
• 马来酰亚胺也可以和叠氮化合物反应，应避免叠氮官能团。
• 标记反应不要放在强光下，因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊(photobleaching)。

  -如需了解更多细节请下载使用手册-