Cy5.5-伯胺 [ Cyanine5.5 amine ]

产品号 :D10026
外观 :深蓝色固体
CAS号 :2097714-45-7
分子式 :C46H58Cl2N4O
分子量 :753.88
ex/em :684/710 nm (PBS缓冲液)
消光系数(ε) :209000 L⋅mol−1⋅cm−1
量子产率(Φ) :0.2
溶解性 :可溶于氯仿,甲醇,乙腈,DMF等有机溶剂,难溶于水
保存条件 :避光,干燥,-20oC保存
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产品描述

Cy5.5 (Cyanine 5.5) 是一种发近红外(NIR)荧光的花青素荧光染料。它的消光系数高,荧光也很亮,并且对pH不敏感,并且由于它的荧光波长(Em:710nm)恰好处于肌体组织近红外窗口 I 的区域(肌体的血液,体液和组织此区域背景荧光弱,而长波长穿透性强),所以Cy5.5常应用于小动物活体体内成像中。 Cy5.5可以用来标记蛋白,抗体,多肽,纳米粒等,它最常见的使用是标记核酸分子(DNA和RNA)。

伯胺基(primary amine)是生物标记反应中常用的基团。蛋白表面赖氨酸侧链(residue)官能团就是伯氨基,伯胺基可以和NHS活化酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯,N-hydroxysuccinimide ester,succinimidyl ester),异氰酸酯(isothiocyanate, ITC)或其它活化基团反应生成稳定链接,从而把Cy5.5分子连接到目标分子上。

Cy5.5-伯胺的水溶性较低,所以在水相的标记反应体系内需要使用有机共溶剂,常用有机溶剂包括DMF,DMSO和乙腈等。如需标记的分子对有机溶剂敏感,可选择磺化花青素(sulfonated cyanine),即磺化-Cy5.5-伯胺( D10032 )。两者的光谱性质几乎一致,因此大部分应用可相互替换。两者的主要区别在于:磺化染料是水溶性的,在水相的标记反应体系内不需要使用有机共溶剂,并且降低染料在水中聚集的可能性,增强标记效率( 了解更多··· )。

Cy5.5-伯胺标记后的产物Ex/Em是684/710nm。和它具有相似荧光特性的染料包括Alexa Fluor 680,DyLight 680等。

注意事项

  • Cy5.5-伯胺水溶性较低,标记反应可在有机溶剂中进行或者含有机助溶剂的水相中进行。
  • 标记时使用不含氨基的缓冲体系,比如磷酸钠缓冲液(PBS),Hepes缓冲液,碳酸氢钠缓冲液;或硼酸缓冲液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的缓冲液,比如Tris,甘氨酸等,它们会和Cy5.5上的伯胺竞争。高浓度咪唑(imidazole)也会影响反应。
  • 标记反应不要放在强光下,因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊(photobleaching)。

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