磺化Cy3.5-马来酰亚胺 [ Sulfo-cyanine3.5 maleimide ]

产品号 :D10041
外观 :深紫色固体
CAS号 :n/a
分子式 :C44H43K3N4O15S4
分子量 :1113.38
ex/em :591/604 nm (PBS缓冲液)
消光系数(ε) :116000 L⋅mol−1⋅cm−1
量子产率(Φ) :0.35
溶解性 :可溶于甲醇,DMF,DMSO等有机溶剂,极易溶于水
保存条件 :避光,干燥,-20oC保存
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产品描述

磺化Cy3.5(sulfo Cyanine 3.5; sulfo Cy3.5)是一种发红色荧光的花青素类荧光染料。磺化Cy3.5是磺化修饰过的Cy3.5,水溶性好,它在显影时可以用561nm或者594nm的激光束激发然后用 Texas Red® 或相似的滤片观察,所以也是一种非常常用的标记染料。磺化Cy3.5可以用来标记蛋白,抗体,多肽,核酸分子,纳米粒等。由于强水溶性加带电荷,磺化花青素标记的生物分子更稳定,不易产生疏水性聚集。

马来酰亚胺(maleimide)是生物标记反应中常用的基团,它可以和巯基(-SH)通过亲和加成反应生成稳定的巯醚(thioester)结构从而实现标记。尽管胺基(比如赖氨酸精氨酸侧链)也有亲和性,但在中性或微酸性缓冲液中,马来酰亚胺选择性标记巯基(反应速度比胺基快>1000倍)。标记反应反应迅速,选择性高,产率好,另外,巯基是一种在生物分子中广泛存在的官能团,比如蛋白中的丝氨酸(cysteine)和双硫键等,因此马来酰亚胺/巯基(maleimide/thiol)标记已成为仅次于NHS/胺基标记的最常用生物连接反应(bioconjugation)。

磺化Cy3.5-马来酰亚胺的水溶性非常好,所以可以在水相的标记反应体系中直接使用,不需要有机溶剂助溶,特别适合标记对有机溶剂敏感的生物分子。另外磺化Cy3.5水溶性极好,并且染料分子本身带电荷,标记到蛋白表面后不会引发疏水性聚集,提高荧光标记产物的稳定性。磺化Cy3.5-马来酰亚胺也溶于甲醇,DMSO,DMF等有机溶剂,标记反应也可以在纯有机溶剂中进行。如需脂溶性Cy3.5染料,可选择普通花青素(cyanine),即Cy3.5-马来酰亚胺 D10035 )。

Cy3.5-马来酰亚胺标记后的产物Ex/Em是591nm/604nm。和它具有相似荧光特性的染料包括Texas Red®,Alexa Fluor 594, BODIPY® TR, DyLight 594等。

注意事项

  • 天然生物分子中巯基一般于氧化状态(如双硫键)存在,在马来酰亚胺标记前,务必用还原剂(如DTT,TCEP)活化巯基并除去多余还原剂。
  • 马来酰亚胺也可以和叠氮化合物反应,应避免叠氮官能团。
  • 标记反应不要放在强光下,因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊(photobleaching)。

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