磺化Cy3-伯胺 [ Sulfo-Cyanine3 amine ]

产品号 :D10028
外观 :红色粉末
CAS号 :2183440-43-7
分子式 :C36H50N4O7S2
分子量 :714.93
ex/em :555/570 nm (PBS缓冲液)
消光系数(ε) :150000 L⋅mol−1⋅cm−1
量子产率(Φ) :0.31
溶解性 :易溶于甲醇,DMF等有机溶剂,极易溶于水
保存条件 :避光,干燥,-20oC保存
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产品描述

磺化Cy3是Cy3(Cyanine 3)的水溶型。它的光谱性质和Cy3类似,在荧光显微镜下发橘黄色荧光。它的荧光很亮,并且对pH不敏感,一般可以用530nm-561nm的激光束激发然后用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的滤片观察,所以在绝大部分荧光仪器上都可以使用。标记后,样品背景荧光一般认为比TAMRA等系列的染料低。 磺化Cy3可以用来标记蛋白,抗体,多肽,核酸等各种生物分子。

伯胺基(primary amine)是生物标记反应中常用的基团。蛋白表面赖氨酸侧链(residue)官能团就是伯氨基,伯胺基可以和NHS活化酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯,N-hydroxysuccinimide ester,succinimidyl ester),异氰酸酯(-N=C=S,isothiocyanate)或其它活化基团反应生成稳定链接,从而把Cy3分子连接到目标分子上。

磺化Cy3-伯胺的水溶性极高,所以在标记反应中不需要使用有机共溶剂,特别适合标记对有机溶剂敏感的生物分子。另外磺化Cy3水溶性极好,并且染料分子本身带电荷,标记到生物分子表面后不会引发疏水性聚集,提高荧光标记产物的稳定性。磺化Cy3-伯胺也溶于甲醇,DMSO,DMF等有机溶剂,标记反应也可以在纯有机溶剂中进行

磺化Cy3-伯胺标记后的产物Ex/Em是555/570nm。和它具有相似荧光特性的染料包括TAMRA,Alexa Fluor 555,DyLight 550,BODIPY® TMR-X等。

注意事项

  • 磺化Cy3水溶性高,极性强,如需脂溶性标记染料,请选择普通Cy3-伯胺( D10022 )。
  • 标记时使用不含氨基的缓冲体系,比如磷酸钠缓冲液(PBS),Hepes缓冲液,碳酸氢钠缓冲液;或硼酸缓冲液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的缓冲液,比如Tris,甘氨酸等,它们会和磺化Cy3上的伯胺竞争。高浓度咪唑(imidazole)也会影响反应。
  • 标记反应不要放在强光下,因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊(photobleaching)。

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