磺化Cy3-马来酰亚胺 [ Sulfo-Cyanine3 maleimide ]

产品号 :D10040
外观 :红色粉末
CAS号 :1656990-68-9
分子式 :C36H41KN4O9S2
分子量 :776.96
ex/em :555/570 nm (PBS缓冲液)
消光系数(ε) :150000 L⋅mol−1⋅cm−1
量子产率(Φ) :0.31
溶解性 :易溶于甲醇,DMF等有机溶剂,极易溶于水
保存条件 :避光,干燥,-20oC保存
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产品描述

磺化Cy3是Cy3(Cyanine 3)的水溶型。它的光谱性质和Cy3类似,在荧光显微镜下发橘黄色荧光。它的荧光很亮,并且对pH不敏感,一般可以用530nm-561nm的激光束激发然后用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的滤片观察,所以在绝大部分荧光仪器上都可以使用。标记后,样品背景荧光一般认为比TAMRA等系列的染料低。 磺化Cy3可以用来标记蛋白,抗体,多肽,核酸等各种生物分子。

马来酰亚胺(maleimide)是生物标记反应中常用的基团,它可以和巯基(-SH)通过亲和加成反应生成稳定的巯醚(thioester)结构从而实现标记。尽管胺基(比如赖氨酸精氨酸侧链)也有亲和性,但在中性或微酸性缓冲液中,马来酰亚胺选择性标记巯基(反应速度比胺基快>1000倍)。标记反应反应迅速,选择性高,产率好,另外,巯基是一种在生物分子中广泛存在的官能团,比如蛋白中的丝氨酸(cysteine)和双硫键等,因此马来酰亚胺/巯基(maleimide/thiol)标记已成为仅次于NHS/胺基标记的最常用生物连接反应(bioconjugation)。

磺化Cy3-马来酰亚胺的水溶性极高,所以在标记反应中不需要使用有机共溶剂,特别适合标记对有机溶剂敏感的生物分子。另外磺化Cy3水溶性极好,并且染料分子本身带电荷,标记到生物分子表面后不会引发疏水性聚集,提高荧光标记产物的稳定性。磺化Cy3-马来酰亚胺也溶于甲醇,DMSO,DMF等有机溶剂,标记反应也可以在纯有机溶剂中进行

磺化Cy3-马来酰亚胺标记后的产物Ex/Em是555/570nm。和它具有相似荧光特性的染料包括TAMRA,Alexa Fluor 555,DyLight 550,BODIPY® TMR-X等。

注意事项

  • 磺化Cy3水溶性高,极性强,如需脂溶性标记染料,请选择普通Cy3-伯胺( D10034 )。
  • 天然生物分子中巯基一般于氧化状态(如双硫键)存在,在马来酰亚胺标记前,务必用还原剂(如DTT,TCEP)活化巯基并除去多余还原剂。
  • 马来酰亚胺也可以和叠氮化合物反应,应避免叠氮官能团。
  • 标记反应不要放在强光下,因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊(photobleaching)。

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