磺化Cy3-NHS 活化酯 [ Sulfo-Cyanine3 NHS ester ]

产品号 :D10016
外观 :黑绿色固体
CAS号 :1424150-38-8
分子式 :C34H38KN3O10S2
分子量 :751.91
ex/em :548/563 nm (PBS缓冲液)
量子产率(Φ) :0.1
消光系数(ε) :162000 L⋅mol−1⋅cm−1
溶解性 :易溶于甲醇,DMF等有机溶剂,极易溶于水
保存条件 :避光,干燥,-20oC保存
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产品描述

磺化Cy3是Cy3(Cyanine 3)的水溶型。它的光谱性质和Cy3类似,在荧光显微镜下发橘黄色荧光。它的荧光很亮,并且对pH不敏感,一般可以用530nm-561nm的激光束激发然后用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的滤片观察,所以在绝大部分荧光仪器上都可以使用。标记后,样品背景荧光一般认为比TAMRA等系列的染料低。 磺化Cy3可以用来标记蛋白,抗体,多肽,核酸等各种生物分子。

NHS活化酯 (N-羟基琥珀酰亚胺酯,N-hydroxysuccinimide ester,succinimidyl ester)是生物标记反应中最常用的活化基团。它活化磺化Cy3分子中的羧基,让它可以和目标生物分子上的胺基(伯胺或者仲胺)反应生成稳定的酰胺键,从而把染料分子标记到生物大分子上。由于游离胺基是蛋白,抗体,多肽表面的常见官能团(来自于赖胺酸侧链),磺化Cy3-NHS可以和它们直接反应。核酸分子中天然不带游离胺基,只有胺基修饰过的RNA或者DNA才可以和磺化Cy3-NHS反应。

磺化Cy3-NHS活化酯的水溶性极高,所以在标记反应中不需要使用有机共溶剂,特别适合标记蛋白等对有机溶剂敏感的生物分子。另外磺化Cy3水溶性极好,并且染料分子本身带电荷,标记到蛋白表面后不会引发疏水性蛋白聚集,提高荧光标记产物的稳定性。磺化Cy3-NHS也溶于甲醇,DMSO,DMF等有机溶剂,标记反应也可以在纯有机溶剂中进行

磺化Cy3-NHS标记后的产物Ex/Em是555/570nm。和它具有相似荧光特性的染料包括TAMRA,Alexa Fluor 555,DyLight 550,BODIPY® TMR-X等。

注意事项

  • NHS ester基团对湿度比较敏感,务必干燥保存产品。使用前产品需放到室温回温至少20分钟。
  • 使用不含氨基的缓冲体系。比如磷酸钠缓冲液(PBS),Hepes缓冲液,碳酸氢钠缓冲液;或硼酸缓冲液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的缓冲液,比如Tris,甘氨酸等。高浓度咪唑(imidazole)也会影响反应。
  • 标记反应不要放在强光下,因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊。
  •   -如需了解更多细节请下载使用手册-

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