磺化Cy7-伯胺 [ Sulfo-Cyanine 7 amine ]

产品号 :D10030
外观 :深绿色固体
CAS号 :2236573-39-8
分子式 :C43H58N4O7S2
分子量 :807.07
ex/em :750/773 nm (PBS缓冲液)
消光系数(ε) :199000 L⋅mol−1⋅cm−1
量子产率(Φ) :0.3
溶解性 :易溶于甲醇,DMF等有机溶剂,极易溶于水
保存条件 :避光,干燥,-20oC保存
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产品描述

磺化Cy7是Cy7(Cyanine 7)的水溶型。它的光谱性质和Cy7类似,属近红外荧光染料。由于它的荧光波长(Em:773nm)恰好处于肌体组织近红外窗口 I 的区域(肌体的血液,体液和组织此区域背景荧光弱,而长波长穿透性强),所以磺化Cy7常常应用于小动物活体体内成像中。磺化Cy7荧光肉眼不可见,显微镜观察时需要近红外滤片,很多荧光显微镜(包括共聚焦显微镜)并不配备,但是流式细胞仪(flow cytometry)常常配备Cy7滤片组。磺化Cy7是常用荧光染料,磺化Cy7可以用来标记核酸,蛋白,抗体,多肽等,它是最常见的小动物显影剂之一。

本产品磺化Cy7荧光基(fluorophore)是优化后的结构,多次甲基桥链(polymethine)经环己烯固化,荧光量子产率提高了20%,从而使荧光更亮。

伯胺基(primary amine)是生物标记反应中常用的基团。蛋白表面赖氨酸侧链(residue)官能团就是伯氨基,伯胺基可以和NHS活化酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯,N-hydroxysuccinimide ester,succinimidyl ester),异氰酸酯(-N=C=S,isothiocyanate)或其它活化基团反应生成稳定链接,从而把Cy7分子连接到目标分子上。

磺化Cy7-伯胺的水溶性极高,所以在标记反应中不需要使用有机共溶剂,特别适合标记蛋白等对有机溶剂敏感的生物分子。另外磺化Cy7水溶性极好,并且染料分子本身带电荷,标记到蛋白表面后不会引发疏水性蛋白聚集,提高荧光标记产物的稳定性。磺化Cy7-伯胺也溶于甲醇,DMSO,DMF等有机溶剂,标记反应也可以在纯有机溶剂中进行。

Cy7-伯胺标记后的产物Ex/Em是750/773nm。和它具有相似荧光特性的染料包括Alexa Fluor 750,DyLight 755等。

注意事项

  • 磺化Cy7水溶性高,极性强,如需脂溶性标记染料,请选择普通Cy7-伯胺( D10024 )。
  • 标记时使用不含氨基的缓冲体系,比如磷酸钠缓冲液(PBS),Hepes缓冲液,碳酸氢钠缓冲液;或硼酸缓冲液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的缓冲液,比如Tris,甘氨酸等,它们会和磺化Cy7上的伯胺竞争。高浓度咪唑(imidazole)也会影响反应。
  • 标记反应不要放在强光下,因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊(photobleaching)。

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