磺化Cy7-马来酰亚胺 [ Sulfo-cyanine7 maleimide ]

产品号 :D10044
外观 :绿色固体
CAS号 :2183440-60-8
分子式 :C43H49KN4O9S2
分子量 :869.10
ex/em :750/773 nm (PBS缓冲液)
消光系数(ε) :199000 L⋅mol−1⋅cm−1
量子产率(Φ) :0.3
溶解性 :易溶于甲醇,DMF等有机溶剂,极易溶于水
保存条件 :避光,干燥,-20oC保存
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产品描述

磺化Cy7是Cy7(Cyanine 7)的水溶型。它的光谱性质和Cy7类似,属近红外荧光染料。由于它的荧光波长(Em:773nm)恰好处于肌体组织近红外窗口 I 的区域(肌体的血液,体液和组织此区域背景荧光弱,而长波长穿透性强),所以磺化Cy7常常应用于小动物活体体内成像中。磺化Cy7荧光肉眼不可见,显微镜观察时需要近红外滤片,很多荧光显微镜(包括共聚焦显微镜)并不配备,但是流式细胞仪(flow cytometry)常常配备Cy7滤片组。磺化Cy7是常用荧光染料,磺化Cy7可以用来标记核酸,蛋白,抗体,多肽等,它是最常见的小动物显影剂之一。

本产品磺化Cy7荧光基(fluorophore)是优化后的结构,多次甲基桥链(polymethine)经环己烯固化,荧光量子产率提高了20%,从而使荧光更亮。

马来酰亚胺(maleimide)是生物标记反应中常用的基团,它可以和巯基(-SH)通过亲和加成反应生成稳定的巯醚(thioester)结构从而实现标记。尽管胺基(比如赖氨酸精氨酸侧链)也有亲和性,但在中性或微酸性缓冲液中,马来酰亚胺选择性标记巯基(反应速度比胺基快>1000倍)。标记反应反应迅速,选择性高,产率好,另外,巯基是一种在生物分子中广泛存在的官能团,比如蛋白中的丝氨酸(cysteine)和双硫键等,因此马来酰亚胺/巯基(maleimide/thiol)标记已成为仅次于NHS/胺基标记的最常用生物连接反应(bioconjugation)。

磺化Cy7-马来酰亚胺的水溶性极高,所以在标记反应中不需要使用有机共溶剂,特别适合标记蛋白等对有机溶剂敏感的生物分子。另外磺化Cy7水溶性极好,并且染料分子本身带电荷,标记到蛋白表面后不会引发疏水性蛋白聚集,提高荧光标记产物的稳定性。磺化Cy7-马来酰亚胺也溶于甲醇,DMSO,DMF等有机溶剂,标记反应也可以在纯有机溶剂中进行。

磺化Cy7-马来酰亚胺标记后的产物Ex/Em是750/773nm。和它具有相似荧光特性的染料包括Alexa Fluor 750,DyLight 755等。

注意事项

  • 磺化Cy7水溶性高,极性强,如需脂溶性标记染料,请选择普通Cy7-伯胺( D10038 )。
  • 天然生物分子中巯基一般于氧化状态(如双硫键)存在,在马来酰亚胺标记前,务必用还原剂(如DTT,TCEP)活化巯基并除去多余还原剂。
  • 马来酰亚胺也可以和叠氮化合物反应,应避免叠氮官能团。
  • 标记反应不要放在强光下,因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊(photobleaching)。

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