生物素标记

生物素标记

生物素(biotin)是一种天然易得的维生素类小分子化合物。亲和素(avidin),包括同族蛋白链霉亲和素(streptavidin),是可和生物素结合的四聚体蛋白。生物素与亲和素的结合是已知自然界中最强的非共价相互作用之一,其解离常数(Kd)大约是10-14mol/L,并且它们的结合对各种条件(包括温度,pH,溶剂等)有良好耐受力,因此它们常常组合成生物素-亲和素系统(Biotin-Avidin System,BAS)被广泛用于分子生物学与生物纳米技术中 。

生物素本身是个游离的小分子,在生物实验中常常需要把它以共价键的方式标记到蛋白或生物材料上,从而来利用BAS系统强大的特异性和亲和力来信号放大,定量检测和样品纯化。这个标记生物素的过程就叫生物素化。保成科技提供各种生物素化试剂,可选择性的标记目标大分子上的胺基,巯基,羧酸等基团上。

生物素标记试剂选择指南

胺基生物素化 (Amine Biotinylation)

这类标记试剂可选择性的,高效的标记生物素到目标大分子表面的伯氨基团上。这类活性氨基广泛存在于蛋白(如ε-lysine and N-terminus)表面,高分子材料(如PEI)和纳米粒等材料上。氨基标记是最常用的生物素化方式和试剂。

巯基生物素化 (Thiol Biotinylation)

这类试剂一般含有马来酰胺(maleimide), 卤乙酰(如iodoacetyl)或者活化巯基(如pyridyldithiol)等可和游离态巯基反应的官能团。巯基存在于蛋白和抗体的双硫键及胱氨酸上,经活化后可和这类生物素化试剂反应生成稳定的硫酯键或双硫键,从而在蛋白上标记生物素。

羰基生物素化 (Carbonyl Biotinylation)

在中性水溶液中,羰基类化合物,包括醛和酮,可以和酰肼或者羟胺反应形成稳定的偶联(腙)。利用这一反应原理,可将带羰基的目标分子生物素化。对于糖基化的蛋白,可以通过氧化反应将糖环氧化为醛基,从而实现蛋白的生物素化标记。

羧酸生物素化 (Carboxyl Biotinylation)

这是一类氨基化修饰过的生物素。多肽的羧基(比如C端),带游离羧酸基的高分子材料,表面含羧酸基团的微粒等,通过EDC等活化剂活化,和这类生物素试剂反应,实现稳定的生物素化标记。

点击化学标记生物素 (Click Biotinylation)

点击化学是绿色,高效,灵敏,稳定的标记反应。可在水相,有机相或者混合相中,也可在细胞培养基中或者动物体内,完成各种复杂的标记任务。点击化学生物素标记试剂包含各种点击化学官能团修饰的生物素,适用于各种生物素标记实验。

标记脱硫生物素 (Desthiobiotinylation)

脱硫生物素是生物素的变种。由于与亲和素(Avidin和Streptavidin)的结合力较低,脱硫生物素标记的蛋白能被洗脱下来,因此,常常用于蛋白纯化实验等。