细胞核及核仁

细胞核及核仁

细胞核(nucleus)是真核细胞中的封闭式膜状细胞器。它内部含有细胞绝大多数的DNA,是细胞主要的基因储存及转录位点。除DNA外,也含多种蛋白质,多糖和一些RNA,一起构造成一个包含核膜,核仁及核纤层的球状细胞器。细胞核一般可以占到细胞体积的10%,并且一般处于细胞的中央位置,是细胞中最显眼的细胞器,常常用于显影标识。荧探生工®提供各种细胞核荧光显影探针,适用于各种实验条件,包括活体细胞,固定细胞,组织切片及各种荧光要求。

核仁是细胞核中最大的球状结构,是细胞核中的转录工厂,由于它的重要生物作用,荧光显影它的准确位置很重要。

活体细胞细胞核

很多实验需要在活体细胞上操作,准确并特异的显影活细胞核很重要。要显影活体细胞细胞核,探针必须可以透细胞膜。荧探生工®拥有一系列荧光显影剂可显影细胞核,包括Hoechst 33342,核黄,核绿,核红等,荧光范围从蓝色到红色各种选择。值得一提的是,这类可透膜探针染料也适用于固定细胞的细胞核显影。

光色 探针名称 同义名称 显影位点 激发峰(nm) 发射峰(nm) 透膜性 产品货号
   Hoechst 33342  Hoechst 33342  细胞核  346  497    
       细胞核        
   核黄    细胞核        
       细胞核        
DRAQ5 -/- 细胞核 633 695 易透膜

固定细胞细胞核

除上述透膜探针染料外,有很多DNA染料是不透膜或难透膜的,这类探针常常用在透膜后的固定细胞细胞核显影中。透膜后,细胞膜有很多小洞,探针可以穿过细胞膜和细胞核结合,从而显影细胞核。这一类探针很多,荧光范围广,和DNA结合能力强,灵敏度高,显影机制等各式各样,可根据实验要求灵活选择。

DAPI (4′,6-diamidino-2-phenylindole)是最常用的半透膜性的细胞核对染剂。DAPI带两个脒基结构,较难透过细胞膜,但是在相当较高浓度下也可透过细胞膜而对染活细胞的细胞核。DAPI主要结合DNA上的小沟,特别是AT碱基富集的小沟。结合后,DAPI荧光增强约20倍,发蓝色荧光。DAPI也和RNA结合,但是荧光很弱,并且荧光相对和DNA结合的DAPI红移(460nm vs 500 nm),所以DAPI的细胞核对染有很好的特异性。另外DAPI水溶性很好(除PBS),价格便宜,是优异的很受欢迎的细胞核探针染料。

光色 探针名称 同义名称 显影位点 激发峰(nm) 发射峰(nm) 透膜性 产品货号
  DAPI -/- 细胞核 358 461 难透膜  
DRAQ7 -/- 细胞核 633 695 难透膜

羰花青 (Carbocyanine)类细胞核染料就是TO-PRO家族染料。从化学结构上说,它是由一个花青素结构荧光核加上一个季铵盐阳离子侧链组成。羰花青类染料带两个阳离子,所以不可以透过细胞膜,但是它们对核酸有较强的亲和性,可嵌入DNA链中从而激发荧光。羰花青类覆盖各种荧光谱段,非常常用。

羰花青类染料选购列表:

光色 探针名称 同义名称 显影位点 激发峰(nm) 发射峰(nm) 透膜性 产品货号
  Po-Pro-1 -/- 细胞核 335 455 难透膜 P10001
Bo-Pro-1 -/- 细胞核 462 482 难透膜 P10009
  Yo-Pro-1 -/-  细胞核 491 509 难透膜 P10002
  To-Pro-1 -/-  细胞核 515 531 难透膜 P10003
  Jo-Pro-1 -/- 细胞核 530 546 难透膜 P10004
  Po-Pro-3 -/- 细胞核 539 567 难透膜 P10005
Bo-Pro-3 -/- 细胞核 574 604 难透膜 P10006
  Yo-Pro-3 -/- 细胞核 612 631 难透膜 P10007
  To-Pro-3 -/- 细胞核 642 661 难透膜 P10008
  To-Pro-5 -/- 细胞核 747 770 难透膜 P10010

羰花青二连体(Carbocyanine dimer, cyanine dimer),有时也叫TO-TO家族,是羰花青的对称二连体。由于二连体结构,它们对DNA的亲和性大大增强,一般比羰花青单体强百倍,Kd达到低纳摩尔级别。二连体自身没有荧光,和DNA嵌合后荧光增加100-1000倍。二连体结构含四个阳离子结构,所以透膜性比单体更差,适用于已固定并透膜的样品。

羰花青二连体染料选购列表:

光色 探针名称 同义名称 显影位点 激发峰(nm) 发射峰(nm) 透膜性 产品货号
  PoPo-1 -/- 细胞核 434 456  不透膜 P10011
  BoBo-1 -/-  细胞核 462 481  不透膜 P10012
  YoYo-1 -/-  细胞核 491 509 不透膜 P10013
  ToTo-1 -/- 细胞核 514 533  不透膜 P10014
  JoJo-1 -/- 细胞核 529 545  不透膜 P10015
  PoPo-3 -/- 细胞核 534 570 不透膜 P10016
  LoLo-1 -/- 细胞核 565 579 不透膜 P10017
  BoBo-3 -/- 细胞核 570 602 不透膜 P10018
  YoYo-3 -/- 细胞核 612 631 不透膜 P10019
  ToTo-3 -/- 细胞核 642 660 不透膜 P10020

死细胞细胞核

核仁