Cy7.5-马来酰亚胺 [ Cyanine 7.5 maleimide ]

产品号 :D10039
外观 :绿色固体
CAS号 :2270866-73-2(类似)
分子式 :C48H51ClN4O3
分子量 :767.40
ex/em :788/808 nm (PBS缓冲液)
消光系数(ε) :223000 L⋅mol−1⋅cm−1
量子产率(Φ) :0.10
溶解性 :可溶于氯仿,甲醇,乙腈,DMF等有机溶剂,难溶于水
保存条件 :避光,干燥,-20oC保存
运输条件 :室温
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产品描述

Cy7.5 (Cyanine 7.5) 是一种发近红外(NIR)荧光的花青素荧光染料。Cy7.5的荧光波长很长,发射峰(Em max)大于800nm,恰好处于肌体组织近红外窗口 I 的区域(肌体的血液,体液和组织此区域背景荧光弱,而长波长穿透性强),所以Cy7.5的标记物常应用于小动物活体体内成像中。Cy7.5可以用来标记蛋白,抗体,多肽等。另外,由于近红外荧光背景低,Cy7.5标记的二抗常常用于荧光蛋白免疫印迹(Western Blot)。

马来酰亚胺(maleimide)是生物标记反应中常用的基团,它可以和巯基(-SH)通过亲和加成反应生成稳定的巯醚(thioester)结构从而实现标记。尽管胺基(比如赖氨酸精氨酸侧链)也有亲和性,但在中性或微酸性缓冲液中,马来酰亚胺选择性标记巯基(反应速度比胺基快>1000倍)。标记反应反应迅速,选择性高,产率好,另外,巯基是一种在生物分子中广泛存在的官能团,比如蛋白中的半胱氨酸(cysteine)和双硫键等,因此马来酰亚胺/巯基(maleimide/thiol)标记已成为仅次于NHS/胺基标记的最常用生物连接反应(bioconjugation)。

Cy7.5-马来酰亚胺的水溶性较低,所以在水相的标记反应体系内需要使用有机共溶剂,常用有机溶剂包括DMF,DMSO和乙腈等。如需标记的分子对有机溶剂敏感,可选择磺化花青素(sulfonated cyanine),即磺化Cy7.5-马来酰亚胺( D10045 )。两者的光谱性质几乎一致,因此大部分应用可相互替换。两者的主要区别在于:磺化染料是水溶性的,在水相的标记反应体系内不需要使用有机共溶剂,并且降低染料在水中聚集的可能性,增强标记效率。

Cy7.5-马来酰亚胺标记后的产物Ex/Em是788/808nm。和它具有相似荧光特性的染料包括Alexa Fluor 790,DyLight 800,吲哚菁绿(indocyanine green, ICG)等。

注意事项

  • Cy7.5-马来酰亚胺水溶性较低,标记反应可在有机溶剂中进行或者含有机助溶剂的水相中进行。
  • 天然生物分子中巯基一般于氧化状态(如双硫键)存在,在马来酰亚胺标记前,务必用还原剂(如DTT,TCEP)活化巯基并除去多余还原剂。
  • 马来酰亚胺也可以和叠氮化合物反应,应避免叠氮官能团。
  • 标记反应不要放在强光下,因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊(photobleaching)。

  -如需了解更多细节请下载使用手册-

荧光光谱

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